DIO細(xì)胞膜綠色熒光探針
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DiO即DiOC18(3),全稱為3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine
perchlorate,是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。
DiO在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長(zhǎng)為484nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為501nm。
DiO可以溶解于無(wú)水、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.72
CAS:34215-57-1
DiO被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑(long-term
tracer)。DiO通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的生存力(viability)。DiO對(duì)于細(xì)胞膜染色的熒光強(qiáng)度通常要低于DiI,有時(shí)對(duì)于某些經(jīng)過(guò)固定的組織的染色效果欠佳。
DiO除了簡(jiǎn)單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程中細(xì)胞遷移,通過(guò)FRAP(Fluorescence
Recovery After Photobleaching)檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對(duì)于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
保存條件:
4℃避光保存,一年有效。配制的儲(chǔ)存液-20℃避光保存,半年有效。
注意事項(xiàng):
熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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